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外部形態(tài)鑒定
定義及分類:根據(jù)玉米品種的種子、幼苗和植株外部形態(tài)的差異鑒定品種,分為種子形態(tài)鑒定法、幼苗形態(tài)鑒定法和田間種植鑒定法等。
種子形態(tài)鑒定法特點:簡單、方便、快速,在傳統(tǒng)農業(yè)生產(chǎn)中應用普遍,但可供鑒定的種子性狀少且易受種子成熟度、種子生產(chǎn)生態(tài)環(huán)境和種子貯藏等條件影響,鑒定結果具有一定的主觀性。品種間種子形態(tài)差異越來越小,鑒定形態(tài)差異來辨別種子越來越困難,準確性也越來越低。
幼苗形態(tài)鑒定法特點:所需試驗設備及操作簡易、成本低,但能用于品種鑒定的幼苗特異性狀較少,所以只能用于有明顯差異品種間的鑒定。
田間種植鑒定法特點:具有合法性、科學性、準確性等優(yōu)點,是進行品種真實性鑒定結論判定的最終方法,但周期性長、時效性差、工作量大,不能滿足現(xiàn)代農業(yè)生產(chǎn)及種子貿易中快速鑒定的要求。
蛋白質指紋圖譜法
定義與分類:利用電泳技術對待檢測樣品的種子或幼苗的蛋白質進行分離、染色,形成蛋白質電泳圖譜,與標準樣品進行比較,來鑒定品種。包括同工酶電泳、種子貯藏蛋白電泳法等。
同工酶電泳法特點:目前,已有30多種同工酶用在作物品種鑒定中,最常用的是脂酶同工酶和過氧化物同工酶等。同工酶電泳雖然比形態(tài)鑒定更加快速,但同工酶具有植物組織及器官特異性,受個體發(fā)育及生態(tài)環(huán)境的影響,且一些種類的同工酶在提取和分離過程中容易失去活性。
種子貯藏蛋白電泳法特點:在品種鑒定上應用較多的是醇溶蛋白(和谷類)和球蛋白(豆類)。該方法直接從種子中提取蛋白質,操作技術簡單,結果相對穩(wěn)定,但是隨著近親品種的不斷涌現(xiàn),尋找品種鑒定用的特異蛋白的難度增大。
DNA指紋圖譜法
定義與分類:學名為DNA分子標記鑒定法,通常也稱為DNA指紋圖譜法,種類較多,當前在農業(yè)行業(yè)標準中常用的方法為簡單重復序列(SSR)標記法。
SSR標記法通常是指以2個——5個核苷酸為單位串聯(lián)重復不同次數(shù)形成簡單重復序列,在不同品種的基因組DNA中簡單重復序列的重復次數(shù)有差異,這種差異可以通過聚合酶鏈反應(PCR)擴增及電泳法進行檢測,從而能夠區(qū)分不同品種。
SSR標記法特點:SSR標記廣泛、隨機、均勻的分布在基因組中,可以提供整個基因組的遺傳信息,參與遺傳物質結構的改變、基因調控等過程,能夠直接反應品種遺傳物質在DNA水平上的差異。具有準確性高、多態(tài)性高、檢測重復性好、操作簡便、經(jīng)濟、不受季節(jié)和環(huán)境影響等特點。以SSR標記法為主,形態(tài)鑒定方法為輔,能夠更高效、更準確進行品種鑒定。
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