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豬的人工授精實驗室要求干凈清潔,操作臺清潔干燥,并安裝空調(diào),將溫度控制在24-26℃之間。
配制稀釋液。準確稱量好BTS稀釋粉(葡萄糖37.15g、檸檬酸鈉6g、EDTA鈉鹽1.25g、碳酸氫鈉1.25g、青霉素鈉0.5g、硫酸鏈霉素1g)或Gueiph稀釋粉,加入500ml的雙蒸水,充分攪拌,使其完全溶解,然后加入雙蒸水至1000毫升,放在35oC的恒溫水浴箱里保存待用。
將準備使用的移液管、玻璃棒、載玻片、蓋玻片放入35℃恒溫容器,開啟好顯微鏡、恒溫加熱板。
精液送達后先觀察精液的顏色、嗅其氣味,正常的精液呈乳白色或灰白色,略帶腥味,如呈灰黃色或血色帶尿臊味應棄掉。
用量筒或電子稱測量好采精量,并做好記錄,將精液放待分裝稀釋的容器里置于35℃的恒溫水浴箱里待檢。
先用200倍的顯微鏡觀察精子的活力,做出初步評定,精子的活力不能低于0.8才可使用。
用比色計或精子計數(shù)器計算出每毫升原精液所含的精子數(shù),再計算出總的精子數(shù)。例如:采精量為200ml,每毫升2.3億個精子,總精子數(shù)為460億,每份稀釋好的精液按80毫升30億個精子計算,可生產(chǎn)15頭份的稀釋精液,加入1000ml的稀釋液即可。
確定好所需稀釋的倍數(shù)后,先按1∶1的比例用玻璃棒引流向原精液容器中緩緩地加入稀釋液,輕輕攪拌10分鐘-15分鐘,觀察加入稀釋液后精子的活力是否受影響。然后按相同的方法加入所需的稀釋液,待攪拌均勻后,分裝(輸精袋、瓶),置常溫下約1小時后用毛巾包好放入17℃恒溫冰箱里保存待用。
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