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1．    技術(shù)簡介

抗生素是微生物在代謝過程中的一種對其他微生物具有殺滅或抑制作用的次級代謝產(chǎn)物?？股氐陌l(fā)現(xiàn)使人類掌握了治療感染性疾病的有力武器，抗生素在獸醫(yī)和畜牧業(yè)生產(chǎn)中均有大量應(yīng)用，臨床診斷用于呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)感染的治療，大部分抗生素作為獸藥添加劑用于動(dòng)物疾病預(yù)防、降低死亡率和促生長。但抗生素存在耐藥性、過敏和穩(wěn)定性等問題，對人有毒害作用，因此是各國獸藥殘留監(jiān)控的重要內(nèi)容。
抗生素種類很多，目前發(fā)現(xiàn)的有上千種，常見的抗生素主要包括以下幾大類：
（1）β-內(nèi)酰胺類：包括青霉素類、頭孢氨芐（先鋒霉素IV）、頭孢噻肟等。
（2）氨基糖苷類：包括鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素、新霉素、壯觀霉素等。
（3）四環(huán)素類：包括四環(huán)素、金霉素、土霉素、強(qiáng)力霉素等。
（4）氯霉素類：包括氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素。
（5）大環(huán)內(nèi)酯類：包括紅霉素、泰樂菌素、替米卡星、北里霉素。
（6）林可胺類：包括林可霉素（潔霉素）、氯潔霉素。
（7）多肽類：包括桿菌泰、粘桿菌素、維吉尼霉素。
（8）多烯類：制霉菌素、兩性霉素B。
由于抗生素種類繁多，化學(xué)性質(zhì)不同，因此檢測方法也千差萬別，但總歸可以歸為兩類：化學(xué)測定法和免疫測定法。下面將進(jìn)一步介紹基本的測定步驟。

2．    應(yīng)用條件

抗生素殘留檢測屬復(fù)雜的痕量組分分析技術(shù)，多數(shù)殘留水平為1ug/Kg~1mg/Kg，對檢測條件及儀器設(shè)備要求都極高，從事此項(xiàng)工作的機(jī)構(gòu)一般都配有氣相色譜、液相色譜、質(zhì)譜以及靈敏度更高的多級質(zhì)譜，這些儀器的價(jià)格都非常昂貴。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要好，避免與外界環(huán)境間的交叉污染。檢驗(yàn)人員要有較高的素質(zhì)，有深厚的現(xiàn)代化學(xué)背景知識，實(shí)驗(yàn)技能強(qiáng)，具有分析問題和解決問題的能力。這些都是從事檢測工作所必需的。

3．操作規(guī)程

抗生素殘留分析的目的是了解待測組分的種類（定性）和濃度（定量）。生物樣品中含有大量性質(zhì)未知的組分，以無法預(yù)料的方式影響分析過程，分離和檢測是一個(gè)殘留分析方法的兩個(gè)基本組成部分。
（1）分離
一般根據(jù)待測物樣品基質(zhì)的性質(zhì)差異，利用組合的分離步驟（多維分離）可以達(dá)到分離和分析目的要求。多數(shù)分析方法中至少采用個(gè)分離步驟：1個(gè)提取步驟（將待測物從樣品中釋放進(jìn)入溶液狀態(tài)）；1~3個(gè)凈化步驟（除去部分干擾雜質(zhì)）；1個(gè)分離步驟，或稱分辨，指借助儀器進(jìn)行連續(xù)在線分離的過程。
色譜是最重要的分離技術(shù)。這種由固定相和流動(dòng)相組成的分離體系可供選擇的分離機(jī)制很多，幾乎能夠利用待測物所有常見的理化性質(zhì)，如極性/非極性、溶解性、酸堿性、分子量大小等。
（2）檢測
直接對痕量殘留物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法，主要利用待測物分子的整體性質(zhì)，如紫外/可見（UV/Vis）、紅外（IR）、熒光（Fluor）、核磁共振（NMR）、質(zhì)譜（MS）等波譜學(xué)性質(zhì)。另外，待測物濃縮和衍生化也是常用的提高檢測靈敏度的方法。

4．注意事項(xiàng)

檢測方法的可行性是決定殘留檢測結(jié)果的關(guān)鍵。因此需要對其進(jìn)行科學(xué)的評價(jià)，任何一種檢測方法都可以通過以下幾條檢驗(yàn)指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證：
a．精密度：指分析結(jié)果的重復(fù)性和重現(xiàn)性。對于定量方法，重復(fù)性的精密度應(yīng)控制在15%，最高不要超過20%，重現(xiàn)性的精密度可以在重復(fù)性精密度的基礎(chǔ)上加倍。除方法本身和操作因素外，精密度大小還與待測物濃度有關(guān)。以下數(shù)據(jù)可供參考：

濃度（mg/kg）    變異系數(shù)CV（%）
   ≤1                 35
   1~10                30
   10~100              20
   ≥100                5

b．準(zhǔn)確度：指測定值與真實(shí)值的接近程度，通常采用添加回收率來表示。定量方法的回收率范圍應(yīng)為79~110%，平均回收率80%以上。以下數(shù)據(jù)可供參考：

濃度（ug/kg）    允許回收率范圍（%）
   ≤1                50~120
   1~10               60~120
   10~100             70~110
   ≥100              80~110

c．檢測限（LOD）與定量限（LOQ）：
一般要求：LOD≤0.1MRL（*殘留限量）
          LOQ≤0.2MRL

d．線性范圍

e．選擇性

f．與參比方法的分析結(jié)果的相關(guān)性比較

g．實(shí)驗(yàn)室協(xié)同研究


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