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　　幾年來，隨著國內(nèi)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的蓬勃發(fā)展，養(yǎng)殖魚類品種在不斷增加，新的魚類疾病也在不斷出現(xiàn)，魚病防治已成為魚類養(yǎng)殖的首要問題。1999年8月海南省臨高縣新盈港某養(yǎng)殖公司養(yǎng)殖的軍曹魚苗大規(guī)模發(fā)病死亡，對送檢樣品進行解剖，并經(jīng)細菌分離、培養(yǎng)和鑒定，認為本次魚病是由蠟狀芽胞桿菌引起。

　　一、發(fā)病情況

　　1999年7月，海南省臨高縣新盈港某養(yǎng)殖公司從三亞引進軍曹魚苗5萬多尾，置于海灣的網(wǎng)箱中養(yǎng)殖，魚苗是三亞某公司從國外引進的，當時氣溫高37℃-38℃，水溫32℃-34℃，魚苗入箱未經(jīng)消毒。經(jīng)20-25天飼養(yǎng)后，魚苗陸續(xù)發(fā)病死亡。據(jù)技術(shù)員提供信息，投喂各種魚病常用藥物和使用多種消毒藥類均無效。半個多月，已死亡約3萬多尾，死亡率約60％。

　　二、臨床癥狀及病理變化

　　據(jù)養(yǎng)殖人員介紹，魚苗在網(wǎng)箱中養(yǎng)殖20天后，開始出現(xiàn)死亡，發(fā)病個體不攝食，游動遲緩，長時間浮于水面，體色深發(fā)黑，其中有一部分眼球發(fā)白似人們常說的白內(nèi)障，眼突出，頭大，解剖檢查病魚，魚體腹部扁瘦，解剖后發(fā)現(xiàn)腸內(nèi)無食物，腸道明顯充血，肝臟有出血點，剖開瞎眼個體的眼球，其內(nèi)容物如豆腐狀。

　　三、細菌學(xué)檢查

　　1.鏡檢

　　無菌條件下取病魚的眼、肝、腸內(nèi)容物直接涂片后，采用革蘭氏染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)涂片上有大量革蘭氏陽性球桿菌，也有兩端較平的粗桿菌和鏈狀桿菌。

　　2.分離培養(yǎng)

　　（1）直接培養(yǎng)和增菌培養(yǎng)

　　用接種環(huán)無菌分別接取魚的眼球內(nèi)容物、肝臟直接接種于3.5％NaCl肉湯瓊脂平板，在37℃條件下培養(yǎng)24小時，同時在3.5％NaCl營養(yǎng)肉湯中進行增菌培養(yǎng)。同樣取眼球內(nèi)容物、肝臟置于3.5％NaCl肉湯中在37℃條件下培養(yǎng)24小時，培養(yǎng)后肉湯渾濁，液面上形成一層菌膜。取培養(yǎng)液分離于3.5％NaCl的肉湯瓊脂平板上，在37℃條件下培養(yǎng)24小時，培養(yǎng)結(jié)果顯示，直接分離培養(yǎng)在3.5％NaCl肉湯瓊脂平板上的菌落較大，約3-4mm，增菌后再分離培養(yǎng)的菌落較小，約2-3ｍｍ。直接分離培養(yǎng)的細菌在培養(yǎng)12小時左右，菌落表面光滑，乳白色，取菌落染色、革蘭氏陽性，為球桿菌；取肉湯培養(yǎng)液染色，革蘭氏陽性，為鏈狀球桿菌和牙胞桿菌；培養(yǎng)18-24小時后，平板上菌落為融蠟狀，乳白色，不光滑菌落，革蘭氏染色，為陽性菌，且為芽胞桿菌，芽胞不突出于菌體橫經(jīng)。

　?。?）接種培養(yǎng)

　　從肉湯瓊脂平板上取單個菌株接種于3.5％NaCl三糖鐵、3.5％半固體瓊脂以及綿羊血平板，37℃條件下培養(yǎng)24小時，從顯示結(jié)果表明，該菌分解葡萄糖產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣、不產(chǎn)Ｈ2Ｓ、有動力、α溶血。

　?。?）生化鑒定

　　生化鑒定項目參照何曉青主編的《衛(wèi)生防疫細菌檢驗》的有關(guān)項目進行，其結(jié)果如下表：

　　明膠 葡萄糖 麥芽糖 蔗糖 水揚苷 蕈糖 乳糖 甘露醇 鼠李糖 木膠糖 動力

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　　(4)藥敏試驗利用瓊脂擴散法對分離出來的菌落做了11種藥物敏感性試驗，藥物分別為：丁胺卡那、復(fù)方新若明、羧芐青霉素、氨卡青霉素、青霉素、氯霉素、鏈霉素、先鋒Ｖ、氟哌酸、慶大霉素、紅霉素，試驗結(jié)果表明，該菌落對慶大霉素、復(fù)方新若明、紅霉素三種藥物敏感。對其它藥物不太敏感，或具有耐藥性。

　　四、治療

　　根據(jù)魚苗發(fā)病特征，體質(zhì)差及氣溫高等特點，采用防與治相結(jié)合措施：①把網(wǎng)箱移至水較深、海水易交換的水體，改善水環(huán)境。②飼料中加入藥物，慶大霉素每公斤魚體重用0.3ｇ，強力霉素每公斤魚體重加0.6ｇ，同時配合維生素Ａ、維生素Ｃ、維生素Ｅ及復(fù)合維生素Ｂ，每公斤魚體重各加0.1-0.2ｇ，每天投喂2次，連續(xù)一周。③禽用紅霉素進行魚體及網(wǎng)箱內(nèi)消毒。在網(wǎng)箱周圍掛袋，使網(wǎng)箱內(nèi)水體成0.3ｐｐｍ濃度。

　　用以上方法治療，4-5天后，死魚由原來的每天一百多條減少到每天十幾條，一星期后，病情得到控制。

　　五、小結(jié)和討論

　　根據(jù)臨床癥狀，病理變化和細菌學(xué)診斷結(jié)果，可初步判定這是一起由臘狀芽胞桿菌引起的細菌性魚病。蠟狀芽胞桿菌為條件致病菌，廣泛存在于空氣、土壤、污水、腐爛草中，并易污染各種食品飼料，軍曹魚苗發(fā)病的原因，可能是：①魚苗在大密度環(huán)境中運輸，體有外傷，在魚苗入箱時，沒有及時做消毒處理，為細菌等病原菌的感染提供了路徑；②魚苗在一個月時間內(nèi)從國外到飼養(yǎng)地曾兩次改變飼養(yǎng)環(huán)境，魚苗體質(zhì)減弱，抵抗病菌能力下降；③7-8月間，養(yǎng)殖地連續(xù)大雨，氣溫變化大，抵抗力較低的魚苗易為病菌感染；④7-8月氣溫較高，空氣溫度大，飼料中的各種維生素較易氧化變質(zhì)，而在魚苗飼養(yǎng)管理中沒有適當添加各種維生素和微量元素，提高魚苗的抗病力。多種綜合因素的作用下，透發(fā)了該病，發(fā)病魚苗的典型癥狀是體瘦，約半數(shù)有瞎眼病。這是一種極為少見的魚病，發(fā)病后傳染率高，治療不及時，可能導(dǎo)致全軍履滅。