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?。ㄒ唬┯左w選優(yōu)與布池
受精卵發(fā)育到初期耳狀幼體后,健壯、發(fā)育良好的幼體在靜水中分布于池水表層,畸形、不健康或死亡胚體則多沉于池水底層,利用幼體這一特點,清除質(zhì)量差、死亡的胚體和其它污物,讓健康幼體在池內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng),即為幼體選優(yōu)過程。
1.選優(yōu)的方法
(1)虹吸法:就是依靠水位差的壓力,用一根內(nèi)徑3~5cm的橡膠或塑料虹吸管,將幼體由孵化池吸入培育池內(nèi)。虹吸前,先將孵化池停止增氧靜置半小時左右,將池底畸形不健康和死亡胚體及污物吸出池外,然后微量增氧并攪池,進(jìn)行計數(shù),按照計劃的布池密度,將幼蟲吸入培育池。譬如孵化池和幼體培育池容積均為10m3,孵化池內(nèi)幼體密度為5個/ml,計劃初耳幼體培育密度為0.5個/ml,則從孵化池內(nèi)吸1m3水移至一個培育池即可,也就是說,一個孵化池內(nèi)的幼體平均要分到10個培育池內(nèi)。虹吸前要先向培育池注入可蓋住池底的清水,以免幼體吸入培育池過程中與池底磨擦受傷。在整個虹吸過程中,要不斷輕輕攪動孵化池水體使幼體分布始終處于均勻狀態(tài),以保證吸入各培育池內(nèi)幼體數(shù)量準(zhǔn)確。
?。?)拖網(wǎng)法:用260目篩絹制成的拖網(wǎng)將上浮于水表層的幼體拖入培育池。網(wǎng)箱長度與孵化池寬度相當(dāng),高20~40cm。具體操作時,先停止增氧,待幼體上浮后用網(wǎng)在池水表層來回緩慢拖動,使幼體密集入網(wǎng)內(nèi),然后將網(wǎng)口輕輕提起,網(wǎng)底不離水面,將網(wǎng)內(nèi)集中的幼體帶水舀出,如此反復(fù)進(jìn)行多次,當(dāng)觀察到池內(nèi)幼體基本沒有時即可停止。把從孵化池內(nèi)拖出的幼體移入事先備好的水槽中,計數(shù)后按預(yù)定的幼體培育密度再移入各培育池。也可按大致數(shù)量直接移到若干個已加入水的培育池內(nèi),在培育池內(nèi)計數(shù)。用此法拖選幼體,避免了水流的沖擊,幼體不易受傷,還由于避免了將孵化池中的不潔凈海水帶入培育池,從而保持了培育池的水質(zhì)清新。
?。?)網(wǎng)箱濃縮法:將孵化池內(nèi)含有幼體的水用虹吸的方法吸入網(wǎng)箱內(nèi),使水通過網(wǎng)箱流出,幼體濃縮滯留于網(wǎng)箱內(nèi)。網(wǎng)箱用260目篩絹制成,先將網(wǎng)箱系在相應(yīng)大小的網(wǎng)箱架上,網(wǎng)箱架大小與形狀依下水道寬度等情況而設(shè)計,一般為圓柱形或方形。操作時將網(wǎng)箱放在玻璃鋼或塑料槽(盆)上,但網(wǎng)箱上端要高于槽的上沿,以免幼體隨水溢出。用網(wǎng)箱濃縮時水流不能太急,并且還要不斷抖動網(wǎng)箱,以免幼體在急流沖擊下大量貼網(wǎng)而損傷。還要隨時用玻璃杯取樣,觀察箱內(nèi)幼體密度,當(dāng)幼體在箱內(nèi)集中到一定數(shù)量后,應(yīng)及時從網(wǎng)箱內(nèi)舀出,移入培育池。用此法選育易損傷幼體,但因沒有孵化池不潔凈海水的帶入,也保證了培育池的水質(zhì)清新。
?。?)直接在原孵化池培育:若受精卵布池密度不大(1個/ml以下),并且是用人工授精法授精,孵化水較潔凈,且孵化率正常,也可不必將幼體選入它池??上韧V乖鲅跏菇】涤左w上浮,將池底不健康幼體和死亡胚體以及污物吸凈后,再靜置半小時使健康幼體全部上浮,然后將下層池水放掉1/2~2/3,再次加注新水后直接進(jìn)入幼體培育階段。
2. 幼體培育密度
主要指初耳幼體布池時的密度,培育密度的大小,直接影響幼體的生長發(fā)育和育苗效果。若布池密度過大,幼體易出現(xiàn)生長緩慢,畸形個體增加的現(xiàn)象,培育4~5天后,常會出現(xiàn)幼體畸形、胃萎縮甚至潰爛的現(xiàn)象。當(dāng)然,密度太小又不利于充分利用培育水體。多年的實踐證明,培育密度掌握在0.5個/ml左右為好,到變態(tài)附著前,健康幼體密度有0.1~0.2個/ml就足夠了。在適宜的密度范圍內(nèi),密度越小,幼體發(fā)育越快,生長幅度越大,成活率和變態(tài)率越高。
(二)餌料投喂
當(dāng)刺參幼體發(fā)育至初耳幼體時,消化道已經(jīng)貫通,即可開始投餌。
1.餌料種類
(1)單胞藻餌料 浮游單胞藻是刺參幼體最適宜的餌料。通過多年的育苗實踐,從不同餌料育苗效果的比較分析中,篩選出了比較適合刺參幼體的幾種單胞藻餌料。
1、最適餌料:主要是角毛藻和鹽藻。角毛藻個體小,懸浮性強(qiáng),細(xì)胞壁薄,幼體對其消化、吸收能力強(qiáng),其適宜繁殖溫度與耳狀幼體培育水溫相似,并且培養(yǎng)方法較簡單,易于大批量生產(chǎn),可以滿足大水體人工育苗的需要。鹽藻個體較小,無細(xì)胞壁,只有細(xì)胞膜,易消化,其適宜的繁殖水溫與耳狀幼體的培育水溫也相吻合,并且鹽藻的營養(yǎng)價值極高。投喂這兩種餌料的幼體生長發(fā)育迅速,成活率和變態(tài)率高。
2、適宜餌料:包括小新月菱形藻、三角褐指藻、中肋骨條藻等。這幾種單胞藻個體小、活力弱、宜高密度、大面積培養(yǎng)。耳狀幼體對其消化、吸收能力不及角毛藻與鹽藻,顯微鏡下經(jīng)常見未被消化的完整藻體排出體外,但仍有相當(dāng)數(shù)量的藻體被消化吸收,胃液顏色正常,幼體的生長發(fā)育較快,成活率和變態(tài)率仍可達(dá)到較高的水平。這幾種單胞藻生長繁殖的最適溫度為14~18℃,與育苗前期水溫相吻合,因此是刺參育苗前期和控溫育苗期間耳狀幼體的重要餌料來源,可單獨投喂,但與角毛藻和鹽藻搭配投喂效果更好。
3、慎用餌料:主要是金藻類,如湛江等鞭金藻、球等鞭金藻3011等。耳狀幼體攝食這幾種餌料后,消化能力弱,攝入后大多呈完整藻體排出體外,且胃液色淡。幼體以攝食金藻類為主時,往往前期生長發(fā)育尚可,但從中耳幼體期開始,幼體胃容易出現(xiàn)萎縮甚至糜爛的現(xiàn)象。故此類餌料不宜長期單獨投喂,但與鹽藻、角毛藻搭配投喂效果很好。
4、不適餌料:除上述幾個品種以外的其它常見單胞藻多為不適餌料,如扁藻、小球藻、微綠藻等,使用效果最差。
(2)代用餌料 在人工育苗室中往往單胞藻餌料不足(亦可以先用“單胞藻生長素”培養(yǎng)),適當(dāng)搭配代用餌料,同樣可以取得好的育苗效果。目前常用的代用餌料主要有海洋紅酵母、“破壁酵母”、“生物多糖”、鼠尾藻等大型海藻磨碎液等。
海洋紅酵母個體小,一般3~6 um,懸浮性強(qiáng),不易下沉,有利于幼體攝食。耳狀幼體攝食后,酵母細(xì)胞在胃內(nèi)分布均勻,能隨胃液的流動而不停地旋轉(zhuǎn),在胃與腸交界處,酵母細(xì)胞體輪廓不清,相互粘連成團(tuán),明顯已被消化。喂單胞藻輔以海洋紅酵母,可加速幼體生長,提高變態(tài)率。在育苗生產(chǎn)中,有的育苗場單純投喂海洋紅酵母有時也可獲得較好的培育效果,而大多情況下單獨投喂難以取得育苗成功,究其原因,可能與不同海區(qū)或同一海區(qū)的不同時段水中所含理化因子與天然餌料的豐度及種類的不同有關(guān)。
“破壁酵母”、“生物多糖”個體大小為5~10um,在增氧或攪池的情況下,能長時間懸浮于水體中,幼體易于捕食,并且消化、吸收也較快。
2.投餌量
不同發(fā)育階段的幼體,對餌料的需求量不同,同一發(fā)育階段的幼體攝食不同品種的餌料,投餌量也不完全相同。
投喂單胞藻餌料,初耳幼體每日投餌2~3次,日投餌量2萬個細(xì)胞/ml左右;中耳幼體每日投餌3~4次,日投餌量2~3萬個細(xì)胞/ml;大耳幼體每日投餌4~6次,日投餌量4萬個細(xì)胞/ml左右。
代用餌料的投喂量,根據(jù)與單胞藻量的搭配比例靈活掌握。一般日投喂量,海洋酵母3~5ml/m3水體(密度為100×108個/ml),“破壁酵母”、“生物多糖”為1~2g/m3水體。鼠尾藻磨碎液要預(yù)先處理,粉碎機(jī)粉碎后,用200目篩絹過濾處理后投喂,日投喂量為2~4g/m3水體。
在生產(chǎn)上,投餌量可通過鏡檢幼體胃的飽滿度和培育池水中的殘餌量具體掌握。一般來說,投餌前取樣觀察,幼體胃內(nèi)有1/3~1/2空間有餌料,胃液色濃,胃形飽滿,表明投餌量合適。若發(fā)現(xiàn)幼體胃內(nèi)餌料量減少,胃液色淡,則表明餌料缺乏,需加大投餌量。或投餌前在10×10倍顯微鏡下觀察培育水體單胞藻量,一個視野有1~3個餌料細(xì)胞,表明投餌量適宜,可維持原量,若水中基本見不到餌料,則說明投餌太少,反之則是投餌過多。
3.投餌注意事項
(1)注意餌料質(zhì)量 投餌前必須針對以下幾方面的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行鏡檢,符合質(zhì)量要求的餌料才能投喂。
1餌料濃度:一般來說,小新月菱形藻、三角褐指藻的密度要在200萬個細(xì)胞/ml以上,角毛藻、鹽藻、金藻的密度要達(dá)到100萬個細(xì)胞/ml以上。單胞藻密度過稀,一般不宜投喂,即使投喂的話,也不能單純?yōu)榱诉_(dá)到要求的餌料數(shù)量而投大量藻液。日投喂藻液量一般不應(yīng)超過培育水體的5%,因為藻液中存在對幼體有害的物質(zhì)。
2原生動物的污染情況:質(zhì)量好的單胞藻餌料基本無原生動物或原生動物極少,在10×10倍顯微鏡下,一個視野面原生動物不超過3個。若原生動物污染嚴(yán)重,則表明餌料質(zhì)量低劣,盡量不喂或少喂。
3藻液新鮮度:新鮮餌料藻體生長正常,無沉淀,無結(jié)塊,無老化藻體。若在水泥池正常情況下培養(yǎng),從接種開始7~10天后仍未投喂的話,要加新水繼續(xù)培養(yǎng),以避免老化。長期放置的老化藻種,即使密度很大、無污染,也不宜使用,因為老化藻種往往有危害刺參幼體的生物毒素存在,大量投喂可導(dǎo)致耳狀幼體爛胃。
?。?)注意餌料的營養(yǎng)搭配
多種餌料搭配好于投單一品種餌料。有試驗表明,兩種以上適宜餌料混合投喂比單純投喂其中一種餌料出苗率提高20%以上。其主要原因是多種餌料的混合投喂使單一餌料間的營養(yǎng)缺陷得以相互補充,更好地滿足了幼體生長發(fā)育的營養(yǎng)需求,如“海參多維”、“免疫促生長素”、“快大壯”、“海參復(fù)合預(yù)混料”等。
?。?)注意投餌方法 以少投勤投為宜,若一次投喂量過大尤其是不易消化的餌料投喂量過大,極易引起幼蟲胃萎縮、潰爛。
?。ㄈ┧|(zhì)管理
水質(zhì)管理的目標(biāo),就是根據(jù)刺參幼體對各項理化因子的需求,采取適當(dāng)措施,使水環(huán)境控制在適宜幼體生長發(fā)育的*水平。
1、換水 換水是改善水質(zhì)的最常用、最直接的辦法。
?。?)換水方法 目前換水起始時間和換水方法多種多樣。大多在初耳幼體入池時,培育池先加水約1/2,幼體入池后的前2~3天內(nèi),由于水質(zhì)比較新鮮,投餌量與幼體代謝產(chǎn)物少,每天只添水不排水,逐漸加滿池后再開始換水。也有的在初耳幼體入池后第二天即開始換水。還可以采用流水培育法,即從初耳幼體入池后,從培育池一端進(jìn)水,從另一端排水,但在投餌后數(shù)小時不能流水。排水時通常用網(wǎng)箱、濾鼓和過濾棒等工具。
A、網(wǎng)箱換水 網(wǎng)箱以200目或260目篩絹制成,形狀多為方形。網(wǎng)箱的高度以高出培育池水面10cm為宜,邊長50~60cm。網(wǎng)箱框架可以硬質(zhì)塑料管或鋼筋焊接而成,框架規(guī)格略大于網(wǎng)箱規(guī)格。將網(wǎng)箱放入培育池一邊,插入虹吸管后往池外吸水。
B、濾鼓換水 濾鼓用直徑20~25cm、長25~30cm的塑料管制成,兩邊封扎上200目或260目篩絹,管中部插入一直徑3~5cm的細(xì)塑料管,在細(xì)管上插入軟管后往外吸水。
?。?)換水量 一般每日換水1~2次,前期每次換水量為培育水體的1/4~1/3,后期每次換水量為培育水體的1/2左右。在具體操作過程中,可視水質(zhì)狀況適當(dāng)增減。流水培育法,因流水時間較長,流速緩慢,幼體貼附篩絹壁上的情況不嚴(yán)重,能減少幼體的機(jī)械損傷,前期日流水量可控制在100%左右,后期增至100~200%。另外,若投喂代用餌料較多,易敗壞水質(zhì),則應(yīng)適當(dāng)增加換水量。
2、增氧與攪池 在靜水條件下幼體易長時間大量密集于水的表層,易造成局部水體水質(zhì)條件惡化,導(dǎo)致幼體發(fā)育不良。因此通常采取增氧和攪池的方法,既可保持幼體在池內(nèi)均勻分布,又補充了池水中氧的消耗。
按池底面積計一般每2~3m2布一個散氣石,連續(xù)增氧,鼓起的氣泡要細(xì)小,氣泡石應(yīng)在80目以上,使水面呈微波狀即可。忌增氧量過大,否則易沖起池底沉積的污物,敗壞水質(zhì),還能使幼體上下劇烈滾動,造成損傷。同時,氣量過大,幼體還容易吞食氣泡,發(fā)生氣泡病,造成幼體死亡。
若培育水體不大或幼蟲密度較小,也可不增氧,采取攪池的方法。一般每0.5個小時攪池一次,用攪耙在池水的中、上層輕輕攪動,使幼體分布趨向均勻。也可攪池和增氧相結(jié)合進(jìn)行。
3.吸底和倒池 幼體新陳代謝產(chǎn)生的排泄物、老化沉積的殘餌、死亡幼體殘骸、海水中懸浮物質(zhì)的沉積以及培育池中繁生的原生動物、底棲生物等,長時間大量沉積很容易敗壞水質(zhì)、孳生細(xì)菌。一般采取吸底和倒池的方法清除,還可以用“底質(zhì)改良劑”、“水易修”進(jìn)行處理,節(jié)省吸底和倒池的次數(shù)和時間。
?。ㄋ模┯左w發(fā)育正常與否的檢測與判定
浮游階段幼體生命力脆弱,屬于死亡高峰期,發(fā)育正常與否,直接影響到育苗生產(chǎn)的成敗。幼體發(fā)育正常與否的判定,可參照以下指標(biāo):
1、體長增長 耳狀幼體的正常體長范圍,初耳幼體450~600um,中耳幼體600~800um,大耳幼體800~1000um。日體長增長平均為50um左右,若明顯低于50um,則屬不正常。
2、外部形態(tài) 耳狀幼體左右對稱,前后比例適宜。幼體臂隨著發(fā)育,日漸粗壯、突出、彎曲明顯,否則為畸形幼體,多易夭折。
3、胃的形態(tài) 耳狀幼體胃的正常形態(tài)為梨形,豐滿,胃壁薄、清晰、透明,胃液顏色較深,顯微鏡下可見餌料隨食道有節(jié)律地收縮不斷進(jìn)入胃內(nèi),經(jīng)消化的餌料,由腸道排出體外。若胃壁增厚、粗糙,胃形狹窄萎縮,模糊不清,或較長時間空胃,應(yīng)立即分析查找原因,否則將迅速惡化,甚至在短時間潰爛。
4、水體腔發(fā)育 初耳幼體胃的側(cè)上方有一圓囊狀體水體腔,到了中耳幼體變?yōu)槔L的囊狀并分為前后兩個腔,隨著幼體不斷發(fā)育,后面的一個腔逐漸形成半環(huán)狀構(gòu)造,圍繞在食道周圍。大耳幼體水體腔出現(xiàn)2~3個凹,凹面向著食道,凸面向外側(cè)。發(fā)育至大耳幼體后期,出現(xiàn)指狀五觸手原基和輻射水管原基。若水體腔發(fā)育遲緩或不發(fā)育,則屬不正常。
5、球狀體出現(xiàn) 大耳幼體后期,軀體兩側(cè)出現(xiàn)大小相似、對稱透明的5對球狀體。若球狀體大小不一,或始終發(fā)育不到5對,則表明幼體發(fā)育不正常。
6、樽形幼體 大耳幼體末期,幼體急劇縮短為原體長的1/2~1/3,身體由透明逐漸變?yōu)椴煌该?,此時球狀體仍清晰可見,幼體出現(xiàn)5條明顯的纖毛環(huán)。
7、五觸手幼體 此期主要特征是5個指狀觸手可以從前端自由伸出。樽形幼體和五觸手幼體之間持續(xù)時間不長,一般1~2天,只要耳狀幼體發(fā)育變態(tài)正常,樽形幼體和五觸手幼體多數(shù)能變態(tài)為稚參。
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