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畜牧家禽網(wǎng) 來源:中國百科網(wǎng) 閱讀數(shù):
一、食用菌菌種瓶的選擇
用100毫升醫(yī)用鹽水瓶代替試管作盛裝培養(yǎng)基的容器。
二、培養(yǎng)基的配制
1.配方:馬鈴薯200克,葡萄糖20克,瓊脂18~20克,水1000毫升。
2.制作:馬鈴薯挖去芽眼,去皮洗凈,切成薄片后加水,在鋁鍋中煮沸25~30分鐘,用4層紗布過濾,取濾液放入鋁鍋中,加入瓊脂,小火加熱并不斷攪拌,待瓊脂溶化后加入葡萄糖,加開水補足1000毫升,攪勻,趁熱裝入鹽水瓶中,每瓶裝8~10毫升,塞上棉塞 棉塞要求干燥、松緊、長度合適 ,再用牛皮紙包住棉塞及瓶口部分,用膠圈扎緊瓶口。
三、滅菌
采用高壓滅菌,若沒有專用高壓鍋,可用家用高壓鍋進行滅菌。方法是:將裝好培養(yǎng)基的菌種瓶放置在高壓鍋中,瓶間留有空隙,不可堆放過緊,以利蒸汽循環(huán),滅菌徹底。當壓力表指針指到0.05時,打開放氣閥,集中排出冷空氣,使壓力降到零時,關(guān)閉排氣閥進行升壓滅菌,自動放氣后保持30分鐘 家用普通高壓鍋滅菌1.5小時 ,讓其自然冷卻,取出放置在接種箱中備用。
四、菌種分離
主要采用組織分離法。通常是從食用菌子實體內(nèi)部分離純菌種,操作時,從子實體內(nèi)切取一小塊組織,放在培養(yǎng)基中培養(yǎng)可長出純菌種,且菌絲萌發(fā)快,遺傳性狀穩(wěn)定,后代不易發(fā)生變異。
1.種菇消毒:種菇采下后,切去菌柄,放入洗凈的盤內(nèi),在裝有紫外燈的接種箱內(nèi)照射20~30分鐘。
2.接種塊切取:在已消毒的接種箱內(nèi),撕開子實體,用經(jīng)酒精燈火焰殺菌冷卻的小刀,在菌柄與菌蓋交接處內(nèi)部切取黃豆大小組織塊,放入菌種瓶內(nèi)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
3.接種塊選擇部位:接種塊選擇部位因食用菌種類不同而異,菇體肥厚的種菇,在菌蓋外緣菌蓋皮和菌褶交接處切取組織塊進行分離。
菌體小、蓋薄、柄空的菌類 如金針菇 ,應快速擊掉菌蓋,用接種針鉤取菌柄頂端生長點組織進行分離。
菌肉極薄菌柄中空孢子不易萌發(fā)的傘菌類,可采用子實層分離法,選取半破膜的子實體,移入培養(yǎng)基上,菌絲萌發(fā)后即轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)基上。對子實體較大、質(zhì)地結(jié)實的多孔菌類,應取子實體外緣菌肉組織塊。
含水量低的子實體切取5平方厘米的小塊,在酒精燈火焰上烘烤5~10秒鐘,使子實體表現(xiàn)微焦,然后用無菌刀切取菌肉組織一小塊,移入培養(yǎng)基上。
五、培養(yǎng)及管理
將放入組織塊的菌種瓶豎放在室內(nèi)架上或平臺上,室內(nèi)溫度控制在20~28℃,經(jīng)過1~2天組織塊萌發(fā)。菌絲生長期間注意觀察。發(fā)現(xiàn)污染及時挑出,經(jīng)過10天左右菌絲長滿瓶,母種制作成功。
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